واکنش های Mitsunobu با استفاده از معرف های iminophosphorane

طراحی استراتژی و توسعه پاسخ

توسعه یک معرف جایگزین موثر برای کاتالیز کردن واکنش میتسونوبو مستلزم بررسی دقیق سه معیار کلیدی است: (1) باید دارای پایه کافی برای deprotone کردن طیف وسیعی از پیش‌نوکلئوفیل‌ها باشد، (2) باید اجازه فعال‌سازی الکل به جایگزینی هسته‌دوست را بدهد و (3) باید محصولات جانبی تولید کند که به راحتی از محصول مورد نظر جدا شوند. برای برآورده ساختن همه الزامات، با الهام از کار قبلی خود در مورد ابرپایه های دو کاره ایمینوفسفوران، به سراغ ایمینوفسفوران ها رفتیم.⁴³. شباهت ساختاری بین واسطه های iminophosphorane و بتائین Morrison-Brun-Huysgen که به ترتیب در طی واکنش های Staudinger و Mitsunobu تشکیل شد، پس از آن آشکار شد.^44،45،46 (شکل 1e). در واقع، ما تصور کردیم که ایمینوفسفوران ها می توانند گونه های نوکلئوفیل را در محل آزاد کنند و الکل را به روشی مکانیکی شبیه به هیدرولیز iminophosphorane فعال کنند.^46،47 (شکل 1f). در واقع، اتحاد مدولار اجزای آزید و فسفین ایمینوفسفوران، فضای شیمیایی وسیع و قابل تنظیمی از معرف‌های بالقوه Mitsunobu را برای بررسی اثربخشی باز کرد.

برای آزمایش فرضیه خود، ابتدا یک واکنش استریفیکاسیون را با یک پیش‌نوکلئوفیل و یک الکل اضافه شده به محلولی از یک iminophosphorane از پیش ساخته شده بررسی کردیم. ما واکنش بین بنزیل الکل و بنزوئیک اسید را با استفاده از 1-آزیدوآدامانتان به عنوان آزید پایدار و سه‌گانه انتخاب کردیم.ص– بوتیل فسفین برای نقطه جوش پایین و خاصیت آبدوست اکسید مربوطه آن¹⁸. خوشبختانه، تشکیل ردپای بنزیل بنزوات تحت این شرایط واکنش اولیه تشخیص داده شد. برای تمایز دقیق بین مکانیسم جایگزینی و استریفیکاسیون، به عنوان (اسانانتیومر پیکربندی شده و راسمیک 1- فنیل اتانول با بنزوئیک اسید تحت شرایط یکسان واکنش نشان دادند (شکل 2a، مدخل 3). اگر چه در مقادیر کمی، استر مربوطه 3c با وارونگی کامل پیکربندی جدا شد، و شواهد واضحی برای یک واکنش جایگزینی هسته دوست دو مولکولی ارائه کرد.

بر اساس این واکنش تثبیت شده، ما به طور سیستماتیک اجزای آزید و فسفین ایمینوفسفوران را بررسی کردیم تا پتانسیل کامل آن را درک کنیم. تعدادی از آزیدها، از جمله آریل آزیدهای غنی از الکترون و کمبود الکترون، بنزیل آزید، آلکیل آزیدهای سوم و ثانویه، و تری متیل سیلیل آزید، با تری-آزید ترکیب شدند.ص-بوتیل فسفین و آزمایش شده در واکنش استریفیکاسیون بین (اس)-1-فنیل اتانول و اسید بنزوئیک. از این، 1-azido-4-methoxybenzene تجاری موجود (موضوع شماره 2101-87-3) به عنوان کاندید ایده آل ظاهر شد (شکل 2a).

سپس توجه به جزء فسفین معطوف می شود. بررسی آریل فسفین های دارای کمبود الکترون و غنی از الکترون، سیکلوهگزیل فسفین و تری-صبوتیل فسفین بدون ابهام زیر سه گانهصبوتیل فسفین به عنوان معرف ممتاز، که مطابق با منطق طراحی اولیه ما، نه تنها از نظر عملکرد، بلکه در تصفیه پایین دست نیز از سایر فسفین ها بهتر عمل می کند (شکل 2b). ترکیب 1-آزیدو-4-متوکسی بنزن و تری-صبوتیل فسفین سیستم ما را برای بررسی بیشتر تعریف کرد.

بهینه سازی بیشتر تولوئن را به عنوان یک حلال ایده آل برجسته کرد (جدول تکمیلی 1)، و یک صفحه استوکیومتری مختصر نشان داد که الکل باید به عنوان معرف محدود کننده، با بیش از حد تمام اجزای دیگر استفاده شود. هنگامی که پیش نوکلئوفیل اسید کربوکسیلیک معرف محدودکننده باشد، واکنش‌پذیری قابل توجهی مشاهده می‌شود، که نشان می‌دهد استوکیومتری را می‌توان در مواردی که پیش‌نوکلئوفیل با ارزش‌ترین ماده اولیه است معکوس کرد (جدول تکمیلی 2).

به موازات آن، ما به دنبال بهینه‌سازی سادگی عملیاتی واکنش بودیم، زیرا تبدیل Mitsunobu در حال حاضر با مجموعه‌ای گیج‌کننده از پروتکل‌ها، اصلاحات و استراتژی‌های تصفیه همراه است که انتخاب شرایط مناسب توسط کاربران نهایی را پیچیده می‌کند. به راحتی، مشاهده کردیم که تشکیل iminophosphorane تقریباً آنی بود، و اجازه می‌داد تا واکنش در یک روش واقعی یک گلدانی با ترتیب مشخصی از افزودن واکنش‌دهنده انجام شود. اگرچه در بسیاری از موارد واکنش‌پذیری در دمای اتاق مشاهده شد، دمای بالا 70 درجه سانتی‌گراد برای همه پیش‌نوکلئوفیل‌ها بدون اطلاع قبلی از واکنش‌پذیری آنها مشترک است و باعث تجزیه محصول نمی‌شود. همچنین انعطاف پذیری بیشتری در انتخاب دما برای بسترهای دشوار ارائه می دهد. در مقابل، DEAD معمولاً فقط در دمای اتاق پردازش می‌شود، زیرا وقتی در یک فضای محدود یا بالای 100 درجه سانتیگراد گرم می‌شود، می‌تواند به شدت تجزیه شود. ¹³).

با شناخت خالص سازی به عنوان یک محدودیت عمده در واکنش Mitsunobu، پروتکل خود را طوری طراحی کردیم که امکان تصفیه بسیار ساده را فراهم کند. محصولات جانبی واکنش ما سهصاکسید بوتیل فسفین و ص-آنیزیدین و همچنین یک معادل اضافی از pronucleophile. سه-صبوتیل فسفین اکسید به راحتی با شستشو با آب حذف می شود ص-آنیزیدین را می توان به طور مشابه در فاز آبی پس از شستشوی اسیدی حذف کرد (شکل تکمیلی 4). ص-آنیسیدین همچنین می تواند از فاز آبی بازیابی شود و برای سنتز آزیدها مورد استفاده مجدد قرار گیرد و کارایی فرآیند را بهبود بخشد. ماهیت دقیق پیش‌نوکلئوفیل استراتژی حذف آن را تعیین می‌کند، اما در صورت تشکیل استر، کربوکسیلیک اسید اضافی را می‌توان در فاز آبی طی شستشوهای پایه حذف کرد. ماهیت ذاتی واکنش جفت بین یک الکل و یک پیش‌نوکلئوفیل به این معنی است که محصولات جایگزین به طور قابل‌توجهی قطبی‌تر از هر یک از مواد اولیه هستند. جداسازی چشمگیر روی سیلیس بین محصول مورد نظر و محصولات جانبی به این معنی است که اغلب فرآیند کار شامل غلظت مستقیم مخلوط واکنش و خالص سازی مستقیم کروماتوگرافی است. با این حال، تصفیه کامل کروماتوگرافی، بعداً غیر ضروری بود. در مقیاس 10 میلی مول و 20 میلی مول، محصولات خالص پس از کار آبی و فیلتر کردن مواد خام از طریق ژل سیلیکا کوتاه به دست آمد.

محدوده پاسخ

با ایجاد یک پروتکل مشترک و از نظر عملیاتی ساده شده، توجه خود را به دامنه روش معطوف کردیم (شکل 3). محدوده پرونوکلئوفیل های اسید کربوکسیلیک در ابتدا مورد بررسی قرار گرفت. اسید استیک، به دلیل شیوع آن در حفاظت از شیمی گروه انتخاب شده است⁴⁸، ارائه شده است 3a در عملکرد عالی با استفاده از (اس)-1-فنیل اتانول به عنوان الکل ثانویه مدل، پیش نوکلئوفیل های اسیدی اضافی مورد بررسی قرار گرفت. هم اسیدهای آروماتیک غنی از الکترون و هم اسیدهای معطر دارای کمبود الکترون به خوبی تحمل می شوند.3b–3 سال). افزایش تقاضای فضایی بین اسیدهای آلیفاتیک نیز تأثیر کمی بر کارایی دارد.3 بعدی–3i)، با یک استر پیوالات 3 ساعت در بازده 82 درصد با وارونگی تمیز پیکربندی به دست آمده است. با استفاده از 3-فنیل-1-پروپانول به عنوان نماینده الکل اولیه فعال نشده، ما دامنه اسیدهای کربوکسیلیک را بیشتر بررسی کردیم. مانند الکل های ثانویه، حجم فضایی تأثیر کمی بر عملکرد دارد.3j–3n) با استر آدامانتیل 3n در بازده 94 درصد تشکیل شده است. ثابت شد که این روش با اسیدهای بسیار عامل دار پایدار است: اسیدهای آمینه محافظت شده با N 3o و 3t به طور موثر متصل می شوند و اسیدهای کربوکسیلیک به صورت شیمیایی انتخابی در حضور هتروسیکل های نیتروژن واکنش نشان می دهند.3q و 3r).

^الفواکنش در مقیاس 0.5 میلی مول انجام شد. ^ب2 equiv الکل، 1 equiv آزید و 1 equiv P(ص-بو)₃ استفاده می شود.

بنزیل الکل واکنش پذیری مشابهی با اسیدهای معطر دارای کمبود الکترون و اسیدهای معطر خنثی از خود نشان می دهد.3s و 3tبنزوئیک اسید، که معمولاً در سنتز برای معکوس کردن پیکربندی استریوشیمیایی یک الکل ثانویه با استری‌سازی Mitsunobu و هیدرولیز بعدی استفاده می‌شود، به عنوان مدلی برای گسترش دامنه الکل عمل می‌کند.⁴⁹الکل های ثانویه ساده و غیرفعال 4- فنیل بوتان-2-ال و منتول⁵⁰ منجر به استرها شد 3u و 3 v با عملکرد متوسط تا عالی حتی نئوپنتیل الکل که S_ن2 بستر، تحت واکنش قرار گرفت، البته با عملکرد کاهش یافته (3 واتهیچ تغییری از هالید برای تشکیل کلرو جایگزین مشاهده نشد 3 برابرمطابق با فعال‌سازی نوع Mitsunobu که واکنش را فقط در مرکز الکل نشان می‌دهد. الکل های ثانویه فعال شده به ویژه عملکرد خوبی دارند (3 سال–3aa)، فقط با استر 3aa نشان دادن کاهش در مازاد انانتیومر نسبت داده شده به S رقابتی_ن1 یا مسیرهای انولیزاسیون و روش اجازه می دهد تا ماکرولاکتونی شدن 15-هیدروکسی پنتادکانوئیک اسید 3ab بدون تنظیم غلظت⁵¹الکل های مشتق شده از محصول طبیعی، اسید لاکتیک و کلسترول، به ترتیب با عملکرد متوسط و خوب واکنش نشان دادند.3ac و 3adدر نهایت، برای ارزیابی سودمندی پروتکل مشتق‌سازی اواخر حالت، آن را روی دو مولکول دارویی اعمال کردیم. استری‌سازی آتالورن، یک عامل درمانی مورد استفاده در درمان دیستروفی عضلانی دوشن.⁵²و تولفنامیک اسید، یک داروی ضد التهابی غیر استروئیدی⁵³، محصولات استر مربوطه را ارائه می دهد 3ae و 3af با بازده بالا به ترتیب 89 و 92 درصد.

خوشبختانه، پروتکل ثابت کرد که به راحتی مقیاس پذیر است. استریفیکاسیون 10 میلی مول بین 3-فنیل-1-پروپانول و 1-آدامانتان کربوکسیلیک اسید در دمای اتاق با استفاده از معادل های کاهش یافته از آزید، فسفین و پرونوکلئوفیل (1.2 معادل) انجام شد تا استر مورد نظر بدست آید. 3n با بازدهی 89 درصدی افزایش بیشتر 20 میلی مول در هر استر حاصل از یک اسید آمینه محافظت شده با N 3tبا استفاده مجدد از 1.2 معادل آزید، فسفین و پرونوکلئوفیل، به بازدهی مشابه 83 درصدی منجر شد. قابل ذکر است، جداسازی محصول تنها به یک کار آبی ساده و فیلتراسیون از طریق یک پلاگ کوتاه ژل سیلیکا نیاز داشت، که نیاز به خالص‌سازی گسترده کروماتوگرافی معمولی شیمی Mitsunobu را برطرف می‌کند.

با در دست داشتن کتابخانه ای از محصولات استر، توجه خود را به هسته دوست های اکسیژن محور کمتر اسیدی معطوف کردیم. خوشبختانه، هر دو فنل غنی از الکترون و کمبود الکترون، پیش‌نوکلئوفیل‌های شایسته‌ای بودند و با الکل‌های اولیه و ثانویه با بازده خوب تا عالی واکنش نشان دادند.3ag–3 ac). قابل توجه است که الکل‌ها خود به عنوان پیش‌نوکلئوفیل عمل می‌کنند و اجازه استری‌سازی و اپوکسیداسیون درون مولکولی را می‌دهند.بند 3 و 3 بامداد). اکسیم ها و 2-پیریدون ها نیز به خوبی عمل می کنند، دومی به طور انتخابی از طریق اکسیژن واکنش نشان می دهد.3 خوابه و 3ao).

تحقیقات بیشتر بر روی سازگاری پیش‌نوکلئوفیل‌های مبتنی بر نیتروژن برای تشکیل پیوند مهم C-N متمرکز شد.⁵⁴ (شکل 4). تعدادی از فتالیمیدها، از جمله آنالوگ های جایگزین نشده، نیترو جانشین شده و آنالوگ های جایگزین شده با کلرو، تحت جفت شدن با الکل های اولیه و ثانویه قرار گرفتند تا محصولات مرتبط با N مربوطه را با بازدهی متوسط تا عالی بدست آورند.4a–4 سال). هتروسیکل‌های نیتروژن پیچیده نیز پیش‌نوکلئوفیل‌های مؤثری هستند.4d–4 گرم). علاوه بر این ن-متیل-صتولوئن سولفونامید همراه با 3-فنیل-1-پروپانول برای ایجاد یک محصول جایگزین N 4 ساعت در بازدهی متوسط چنین سولفونامیدهایی معمولاً در توالی های نوع فوکویاما استفاده می شوند، جایی که انتشار توسیل پایین دست، آمین آزاد را آزاد می کند.⁵⁵. وارونگی پیکربندی با استفاده از یک محصول فتالیمید نشان داده شد 4iهیدرازینولیز به آمین اولیه و به دنبال آن مقایسه HPLC کایرال با تجاری (اس)-1-فنیل اتان-1-آمین به صراحت ثابت کرد که (آر)-1-فنیل اتان-1-آمین از (اس)-1-فنیل اتانول به عنوان انانتیومر اصلی، با فرسایش بیش از حد انانتیومر به دلیل رقابت S_ن1 مسیر.

^الفواکنش با PMe انجام شد₃ در 100 درجه سانتیگراد ^بواکنش با PMe انجام شد₃ در 70 درجه سانتیگراد آن ها، ص-تولوئن سولفونیل

تشکیل پیوند کربن-کربن برای سنتز آلی، چه برای همولوگاسیون ساده و چه برای ساخت مولکول‌های پیچیده ساختاری، اساسی است.به طور خاص، جایگزینی سیانید یک استراتژی مناسب برای همسان سازی زنجیره کربن ارائه می دهد زیرا نیتریل ها به عنوان دسته های مصنوعی همه کاره عمل می کنند.⁵⁶بنابراین ما بررسی کردیم که آیا سیستم ما می‌تواند با استفاده از نوکلئوفیل‌های کربن محور تثبیت‌شده اجازه تشکیل پیوند C-C را بدهد یا خیر. واکنش استون سیانوهیدرین و 3-فنیل-1-پروپانول در شرایط واکنش استاندارد ما نیتریل مربوطه را به دست آورد. 4j با 11 درصد بازدهی با این حال، جایگزینی سهصبوتیل فسفین با تری متیل فسفین و افزایش دمای واکنش از 70 به 100 درجه سانتیگراد باعث افزایش بازده 4j بازدهی تا 75 درصد افزایش واکنش پذیری این ایمینوفسفوران منجر به نیتریل می شود 4j–4o با بازده خوب تا عالی سپس پیش‌نوکلئوفیل‌های کربن جایگزین را بررسی کردیم. خوشبختانه، طیف متنوعی از جمله (فنیل سولفونیل) استونیتریل، دی متیل مالونات، بیس (فنیل سولفونیل) متان، و (2-نیتروفنیل) استونیتریل، به آسانی طراحی شد و محصولات مرتبط الکل های اولیه و ثانویه را فراهم کرد. 4p–4u با بازدهی متوسط تا عالی با این حال، جداسازی محصول 4p به دلیل قطبیت بسیار پایین آن پیچیده بود. فرسایش جزئی در مازاد انانتیومر برای یک محصول متصل به کربن 4 تن منسوب به رقیب S_ن1 مسیر.

آلکیل آریل سولفیدها نقوش برجسته در شیمی دارویی هستند⁵⁷، حفظ علاقه به روش های کلی برای سنتز آنها و آنالوگ های اکسید شده آنها⁵⁸. ارتقای استراتژی کاهش اکسیداسیون موکایاما برای تبدیل الکل ها به آلکیل آریل سولفیدها⁵⁹، ما استدلال کردیم که iminophosphoranes می توانند به طور مشابه دی سولفیدها را از طریق هسته دوستی نیتروژن محور خود فعال کنند.^60,61که امکان تشکیل سولفید را مستقیماً از مواد اولیه الکلی فراهم می کند. این استراتژی از استفاده از تیول های آزاد که اغلب بد بو، سمی و فرار هستند، جلوگیری می کند⁶². برای این منظور، جایگزینی شریک اتصال پیش‌نوکلئوفیلیک با یک دی سولفید را در نظر گرفتیم و همه متغیرهای دیگر را ثابت نگه داشتیم. تحت شرایط واکنش استاندارد ما، این حالت فعال‌سازی واقعاً مؤثر بود. نوکلئوفیل های تیولات در محل تولید می شوند و واکنش، در صورت لزوم، با وارونگی پیکربندی استریوشیمیایی ادامه می یابد (شکل 5).

^الف1 معادله دی سولفید و 1.5 اینچ eq. الکل استفاده شده- ^بمقیاس 1.0 میلی مول. ^ج2 معادله دی سولفید، آزید و فسفین استفاده شد. ^دمقیاس 0.5 میلی مول.

ماهیت کلی تبدیل در طیف وسیعی از بسترهای الکلی ایجاد شد. الکل های بنزیل حاوی جایگزین های غنی از الکترون و فقیر الکترون به طور موثر به سولفیدهای مربوطه تبدیل می شوند.5a–5c، و این تحمل به سایر سیستم های حاوی (هترو)آریل نیز گسترش یافت (5 سال و 5d). الکل های اولیه که دارای موتیف های الکترون خنثی و کمبود الکترون هستند، الکتروفیل های موثری هستند.5f و 5 گرمو الکل‌های آللیک با بازدهی متوسط تا خوب، تحت جایگزینی تمیز و انتخابی منطقه‌ای شدند.5 ساعت و 5i). الکل های ثانویه غیرفعال باعث ایجاد سولفید می شوند 5j و 5 کیلو در بازده عالی، در حالی که الکل های ثانویه فعال نیز گنجانده شدند (5 لیتر و 5 متر). لازم به ذکر است که کلسترول به سولفید مربوطه تبدیل می شود 5n با بازدهی 92 درصد در مرحله بعد، میزان دی سولفیدها را ارزیابی کردیم. دی سولفیدهای آروماتیک و هتروآروماتیک به خوبی تحمل می شوند و محصولات سولفیدی حاوی نقوش بنزیل، پیریدیل، فورانیل و بنزوتیوازیل را ارائه می دهند.5o–5 ثانیه).

مزایای عملیاتی و ملاحظات ایمنی

مقایسه مستقیم پروتکل iminophosphorane و شرایط معمولی Mitsunobu⁶³ با استفاده از DIAD و تری فنیل فسفین برای استری کردن 3-فنیل-1-پروپانول با 1-آدامانتان کربوکسیلیک اسید در مقیاس 2 میلی مول (شکل های تکمیلی 1 و 2) انجام شد. پس از 18 ساعت در دمای اتاق، هر دو واکنش تبدیل کامل را نشان دادند. واکنش با واسطه iminophosphorane استر مورد نظر را پس از کار آبی و فیلتر کردن از طریق یک پلاگ کوتاه ژل سیلیکا، استر مورد نظر را تمیز می‌دهد، در حالی که واکنش Mitsunobu نیاز به خالص‌سازی کروماتوگرافی قابل توجهی برای حذف اکسید تری فنیل فسفین داشت، که دوباره سادگی عملیاتی ارائه شده توسط این رویکرد iminophosphorane را برجسته می‌کند.

برای ارزیابی پایداری حرارتی جزء آزید، کالریمتری اسکن تفاضلی بر روی 1-azido-4-methoxybenzene انجام شد که دمای تجزیه 156 درجه سانتیگراد را نشان داد (شکل تکمیلی 5). مهمتر از همه، در پروتکل ما، آزید فقط در دمای اتاق دستکاری می شود و تقریباً بلافاصله پس از افزودن سه ماده، به ایمینوفسفوران مربوطه تبدیل می شود.صبوتیل فسفین، بنابراین یک پروتکل ساده و ایمن را ارائه می دهد.

علاوه بر این، برای ساده‌سازی و بهبود عملی بودن روش برای کاربران نهایی، استفاده مستقیم از iminophosphorane از پیش ساخته شده را بررسی کردیم، در نتیجه به طور کامل مدیریت آزید را حذف کردیم و تنظیم واکنش را ساده‌تر کردیم. محلول 5/0 مولار ایمینوفسفوران در تولوئن خشک از 1-آزیدو-4-متوکسی بنزن و تری-تهیه شد.ص– بوتیل فسفین، در زیر نیتروژن ذخیره می شود و از نور محافظت می شود. پایداری محلول به‌دست‌آمده قبلی در استری‌سازی 3-فنیل-1-پروپانول با اسید 1-آدامانتان کربوکسیلیک مورد آزمایش قرار گرفت. محلول ذخیره شده پس از 1 ماه موثر باقی می ماند و اجازه می دهد 3n با بازدهی 83 درصدی.

مکانیسم واکنش

برای اثبات تشکیل پیشنهادی یک واسطه ایمینوفسفوران، ما واکنش بین 1-آزیدو-4-متوکسی بنزن هم مولار و تری- را مشاهده کردیم.صبوتیل فسفین در تولوئن-d₈ استفاده کنید ³¹طیف سنجی P NMR. همراه با تکامل ظاهری N₂، در ³¹طیف P NMR یک رزونانس بدون محافظ را در 13.2 اینچ در دقیقه نشان داد (متوسط -32.9 ppm برای Pص-بو)₃مطابق با تشکیل ایمینوفسفوران (برای توصیف کامل به اطلاعات تکمیلی مراجعه کنید)^64,65. در مرحله بعد، برای بررسی زایی ایمینوفسفوران با سایر اجزای واکنش، جفت شدن (اس)-1-فنیل اتانول و اسید سیکلوپروپان کربوکسیلیک به صورت گام به گام از ³¹طیف سنجی P NMR در تولوئن-d₈ (شکل 6). افزودن اسید سیکلوپروپان کربوکسیلیک به ایمینوفسفوران مشتق شده از 1-آزیدو-4-متوکسی بنزن و تری-صبوتیل فسفین در تولوئن دوتره شده، منجر به یک جابجایی شدید به سمت پایین در ³¹رزونانس P از 13.2 تا 46.4 اینچ ppm، مطابق با تشکیل نمک iminophosphonium مربوطه (شکل تکمیلی 6، وسط). افزودن بعدی الکل ثانویه و مشاهده فوری، ظهور سیگنال جدیدی را در 48.5 اینچ پی پی ام نشان داد که به واسطه کلیدی آلکوکسی فسفونیوم نسبت داده می شود.⁶⁶ (شکل تکمیلی 6، پایین). استفاده از نظارت پاسخ اضافی ¹طیف سنجی 1H NMR در تولوئن-d₈ از این وظیفه پشتیبانی کنید پروتون \(\آلفا\) به اکسیژن به صورت یک کوارتت در 4.53 پی پی ام در الکل واکنش نداده و در 5.97 پی پی ام در محصول استر ظاهر می شود. با افزودن یک الکل به محلول ایمینوفسفوران و اسید، این رزونانس به 4.98 اینچ در دقیقه کاهش می یابد که با تشکیل گونه های آلکوکسی فسفونیوم سازگار است (تکمیلی شکل 7، پایین).

³¹آنالیز طیف‌سنجی P NMR برای نظارت بر شکل‌گیری گام به گام واسطه‌های پیشنهادی استفاده شد. مشاهده شده ³¹تغییرات شیمیایی P (\(\دلتا\)، ppm)، ثبت شده در تولوئن-d₈ نشان داده می شوند.